SİBİRYA MERSİN BALIĞI ACİPENSER BAERİİ (BRANDT,1869)'UN SOLUNGAÇ DOKUSU GLUKOZ 6 FOSFAT DEHİDROJENAZININ (EC.1.1.1.49) SAFLAŞTIRILMASI VE KİNETİK KARAKTERİZASYONU
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, BİYOKİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2024
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: BEYZA GÜL KOÇAK
Danışman: Salih Görgün
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:SİBİRYA MERSİN BALIĞI ACİPENSER BAERİİ (BRANDT,1869)'UN SOLUNGAÇ DOKUSU GLUKOZ 6 FOSFAT DEHİDROJENAZININ (EC.1.1.1.49) SAFLAŞTIRILMASI VE KİNETİK KARAKTERİZASYONU Beyza Gül KOÇAK Yüksek Lisans Tezi Biyokimya Anabilim Dalı Danışman: Prof. Dr. Salih GÖRGÜN 2024, 70+xiv sayfa Bu çalışmada, Sibirya Mersin Balığı Acipenser baerii (Brandt,1869) solungacından glukoz 6-fosfat dehidrogenaz (EC.1.1.1.49) (G6PD), 2′ 5′ ADP Sefaroz 4B afinite kromatografisi ile saflaştırılmıştır. Elde edilen enzim preparatının saflaştırma parametrelerinin 114.4 kat saflık, % 68.51 verim ve 1.144 EU/mg.protein spesifik aktivite olduğu belirlenmiştir. Saflaştırmanın başarısını kontrol etmek için yerine getirilen SDS-PAGE analizlerinin sonucu olarak, yaklaşık olarak 63 kDa ve 55 kDa molekül kütleli iki protein bandının varlığı belirlenmiştir. Elde edilen enzim preparatı için optimum sıcaklık ve pH sırasıyla, 40 °C ve 8.0 olarak belirlenmiştir. Enzimin kinetik davranışı gerek glukoz 6-fosfat (G6P) gerekse NADP+ substratları için değerlendirilmiştir. Km ve Vmax değerleri G6P için 8.13 mM ve 0.12 EU/mL olarak belirlenirken, bu değerler NADP+ için 9.17 mM ve 0.13 EU/mL olarak belirlenmiştir. Bu veriler değerlendirildiğinde, A. baerii solungaç G6PD enziminin gerek G6P gerekse NADP+' ya ilgisinin benzer olduğu görülmektedir. Cd2+ ve Cu2+ metal iyonlarının araştırılan konsantrasyonları enzim üzerinde inhibisyon etkisi göstermiştir. Cd2+ ve Cu2+ için IC50 değerleri 1,108- 0,249 mM, Kİ değerleri ise sırasıyla 0,214 ± 0,092 mM ve 0,213 ± 0,121 mM olarak belirlenmiştir. Her iki metal iyonunun A. baerii solungaç G6PD enzimi üzerinde kompetitif (yarışmalı) inhibisyon sergilediği bulunmuştur. Anahtar kelimeler: Glukoz 6-fosfat dehidrojenaz, Acipenser baerii (Brandt,1869), 2′ 5′ -ADP Sefaroz 4B afinite kromatografisi, kinetik karakterizasyon, saflaştırma