Prostat kanseri biyobelirteci prostat spesifik antijenin belirlenmesi için manyetik immünosensör tasarımı

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA MÜHENDİSLİĞİ ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2018

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: NAGİHAN TUZLALI

Danışman: SEMA SALGIN

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu doktora tezi kapsamında prostat kanseri biyobelirteci olan Prostat Spesifik Antijen (PSA)'nin tespit edilmesi için manyetik özelliğe sahip sandviç formunda bir immünosensör tasarlanmıştır. PSA immünosensörünün tasarımının birinci basamağında immünosensörün platform yapısını oluşturan manyetik demir oksit nanopartikül (MIONP)'ler üretilmiş ve MIONP'ların sonraki aşamalarda kullanılabilmeleri için yüzeyleri silanlama tepkimesi ile modifiye edilmiştir. PSA immünosensörünün tasarımının ikinci basamağında ise sandviç formu oluşturmak üzere modifiye edilen MIONP'ların yüzeyine sırasıyla mAb1-PSA, PSA ve HRP enzimi ile işaretli mAb2-PSA-HRP bağlanmıştır. Sentezlenen manyetik PSA immünosensörün etkinliği aktivite ölçümleriyle belirlenmiştir. İmmünosensör aktivitesine MIONP miktarı, çapraz bağlama ajanı türü ve miktarı, spesifik olmayan bağlanma ajanı türü ve miktarı, sıcaklık, tepkime süresi, karıştırma hızı ve pH etkileri incelenmiştir. Her bir parametrenin etkisinin incelendiği durumda PSA immünosensörünün boyut dağılımları ölçülerek kompleks yapının bağlanma etkinliği hesaplanmıştır. MIONP ve manyetik PSA immünosensörü yüzey yükü ve kimyasal yapı analizleriyle karakterize edimiştir. Ayrıca en uygun koşullarda sentezlenen immünosensörün tekrar kullanılabilirliği, seçicilik ve hassasiyeti belirlenmiştir. İmmünosensör tasarımı için en uygun koşullar; 2 mg MIONP, çapraz bağlama ajanları EDC-NHS 15-5 μL, 25 oC sıcaklık, 4 h tepkime süresi, pH=6.2, 200 rpm karıştırma hızıdır. NSB ajanlarının immünosensör performansına önemli katkısı gözlenmemiş ancak immünosensörün tekrar kullanılabilirliği için PEG ve lizinin gerekli oldukları belirlenmiştir. Manyetik PSA immünosensörünün limit belirleme seviyesinin 2.5 ng/mL PSA derişimi olduğu hesaplanmıştır. Bu sonuçlar, manyetik immünosensörün PSA testi için duyarlı ve güvenilir olduğunu göstermektedir.