Amilaz enziminin çapraz bağlı agregatlarının sentezi ve karakterizasyonu

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, BİYOMÜHENDİSLİK ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2020

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: YASEMİN ABOALVARD

Danışman: Sema Salgın

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Son yıllarda, çapraz bağlı enzim agregat (CLEA)'ları, yeni ve çok yönlü biyokatalizör sistemleri olarak ortaya çıkmıştır. Günümüzde enzimlerin CLEA formunun sentezi, en avantajlı taşıyıcısız tutuklama yöntemlerinden biri olarak kabul edilmektedir. Amilaz, biyoteknoloji endüstrisinde yaygın olarak kullanılan hidrolazlar grubu enzimlerden biridir. Amilaz içecek, bira ve deterjan endüstrilerinde yer alan çeşitli enzimatik tepkimelerde önemli rol oynar. Bu çalışmada, amilaz enziminin CLEA formu sentezlenmiştir. CLEA sentezinde CLEA aktivitesi üzerine toplam protein derişiminin etkisi, katkı maddesi lizin derişiminin etkisi, Ca+2 iyonlarının etkisi incelenmiştir. Ayrıca optimum sentez koşullarında üretilen CLEA biyokatalizörleri için en uygun pH ve sıcaklık değerleri ile tekrar kullanılabilirlikleri ve depolama kararlılığı belirlenmiştir. CLEA'ların kimyasal yapıları FTIR analizleriyle, morfolojik yapıları SEM analizleriyle belirlenmiştir. CLEA aktivitesinin en yüksek olduğu koşullar; 200 mg/mL amilaz, 8 mg/mL lizin ve 500 ppm CaCl2 olarak belirlenmiştir. Bu koşullarda sentezlenen CLEA biyokatalizörleri için en uygun pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla 6.0 ve 20οC olarak belirlenmiştir. CLEA'ların depolama kararlılığı 2 ay boyunca incelenmiş ve biyokatalizörlerin başlangıç aktivitesinin yaklaşık %95'ini koruduğu gözlenmiştir. CLEA'ların 5 tepkime halkası sonunda aktivitesinin %31'ini 10 tepkime halkası sonunda ise %10'unu koruduğu gözlenmiştir.